一、服務簡介
細胞周期（Cell Cycle）是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程，細胞的遺傳物質(zhì)復制并均等地分配給兩個子細胞。細胞周期分為間期與分裂期兩個階段。間期又分為三期：即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）與DNA合成后期（G2期）。某些細胞在分裂結(jié)束后暫時離開細胞周期，停止細胞分裂，執(zhí)行一定生物學功能（G0期）。 流式細胞儀的工作原理是將待測細胞放入樣品管中，在氣體的壓力下進入充滿鞘液的流動室。在鞘液的約束下細胞排成單列由流動室的噴嘴噴出，形成細胞柱。通過對流動液體中排列成單列的細胞進行逐個檢測，得到該細胞的光散射和熒光指標，分析出其體積、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、DNA、RNA、蛋白質(zhì)、抗原等物理及化學特征。
細胞內(nèi)的DNA含量隨細胞周期進程發(fā)生周期性變化，如G0/G1期的DNA含量為2C，而G2期的DNA含量是4C。利用PI標記的方法，通過流式細胞儀對細胞內(nèi)DNA的相對含量進行測定，可分析細胞周期各時相的百分比。
二、技術(shù)流程 1、取對數(shù)生長期細胞，倒去培養(yǎng)液，胰酶適度消化細胞，用培養(yǎng)液吹打，800 rpm，離心 15 min去上清。
2、PBS洗2次，加0.5 mL PBS吹勻，務必吹散。
3、用5 mL注射器將細胞吸起，用力打入5 mL 70%(預冷)乙醇中，封口膜封口。4℃固定過夜（可長至2周）。
4、800 rpm 15 min收集固定細胞，PBS洗2次。
5、用0.4 mL PBS重懸細胞并轉(zhuǎn)至Tube中輕輕吹打（防止細胞破碎）。
6、加RNase-A約3 μL至終濃度約為50 μg/mL ，37℃水浴消化30 min；
七、加PI約50 μL至終濃度約為65 μg/mL ，在冰浴中避光染色30 min。
八、用300目（孔徑40~50微米）尼龍網(wǎng)過濾，上機檢測。
九、樣品分析測定及打印。
三、服務說明 1、 客戶提供：狀態(tài)良好的受試細胞；
2、實驗周期：1-2周；
3、明確檢測時間
4、提供流式原文件
四、成果展示
五、詢價及訂購
感謝您選擇我公司的流式檢測細胞周期服務。如有相關(guān)問題請聯(lián)系我們的工作人員。